PCR實驗(experiment)室設(shè)計規(guī)劃主要劃分區(qū)域:
PCR實驗(experiment)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴增、產(chǎn)物分析(Analyse)等三或四個區(qū)域。潔凈實驗室主要用于微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)、動物實驗、基因重組以及生物制品等研究使用的實驗室統(tǒng)稱潔凈實驗室-生物安全實驗室。無菌試驗室、生物安全實驗室由主實功能驗室與其他實驗室及輔助功能用房組成。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室,有上述前面三個區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨立分隔,不應(yīng)有任何的空氣直通。
PCR實驗(experiment)室對污染的預(yù)防與控制(control):
PCR實驗(experiment)室設(shè)計的核心(core)問題是如何避免污染。凈化實驗室必須控制實驗室的潔凈度,對新風(fēng)進(jìn)行過濾,使實驗室達(dá)到一定的凈化要求。其中排風(fēng)系統(tǒng)是重點,對于保證實驗室相對負(fù)壓環(huán)境和有效過濾室內(nèi)污染排風(fēng)起著重要的作用。凈化實驗室控制系統(tǒng)是整個潔凈實驗室安全運行的神經(jīng)中樞,由于潔凈實驗室-生物安全實驗室的實驗對象是危險性的微生物,出于嚴(yán)格控制污染的原則,它要求以最少的維護(hù)人員,運用最優(yōu)化的管理維護(hù)手段,來實時監(jiān)控每一個實驗室中設(shè)備所處的物理環(huán)境,保證實驗室運行過程中始終處于相對負(fù)壓環(huán)境,防止危險性微生物外泄。在實際工作中,常見的有以下幾種污染類型:擴增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。由于一旦發(fā)生污染,實驗就必須停止,直到找到污染源為止,而且實驗結(jié)果必須作廢,需重新進(jìn)行實驗。所以發(fā)生污染后再圍繞(circumfuse)實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣(fán suǒ),浪費人力物力。因此要避免污染,首先應(yīng)是預(yù)防,而不是排除(Remove)。
PCR實驗(experiment)室功能區(qū)分為:
一、普通實驗(experiment)區(qū)——法醫(yī)物證常規(guī)檢驗室、法醫(yī)物證存儲室、受案室、檢材室、骨骼(skeleton)提取實驗(experiment)室、數(shù)據(jù)(data)比對分析(Analyse)室、緊急淋浴洗眼間、潔具間、洗衣間、測序儀專用UPHOTOSHOP機房;
二、特殊實驗(experiment)區(qū) / 污染控制(control)區(qū)——更鞋 / 緩沖走廊、更衣 / 緩沖間、現(xiàn)場物證DNA提取間(30-50㎡)、嫌犯血樣DNA提取間(15-30㎡)、試劑混配間(15-30㎡)、PCR擴增間(15-30㎡)、擴增產(chǎn)物測序間(15-30㎡);